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022-66387942一、熒光素純度重要嗎?
Goldbio熒光素純度為99.7%~99.8%,是市場(chǎng)上熒光素純度最高的產(chǎn)品。其它供應(yīng)商認(rèn)為98%的純度就足夠了,然而,這不足以滿足嚴(yán)格的評(píng)估。比如,假如一個(gè)熒光素只有99%的純度(產(chǎn)品中含有1%的污染物)。如果純度不夠的1g熒光素溶于緩沖液中(對(duì)于體外研究來(lái)說(shuō)一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的稀釋液),那么在緩沖液中將含有0.01g的污染物(即0.4g污染物/L)!如果按照分子量來(lái)計(jì)算那么在實(shí)驗(yàn)中將含有1000g/mol的污染物,那么在溶液中污染物的濃度將是400 uM,這個(gè)濃度將抑制某些酶和細(xì)胞中的生物過(guò)程,且可能會(huì)給實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)偏差,并且可能會(huì)對(duì)您的動(dòng)物造成傷害。
二、甲殼蟲熒光素與螢火蟲熒光素之間有區(qū)別嗎?
甲殼蟲熒光素與熒光蟲熒光素之間沒(méi)有區(qū)別。
三、怎樣溶解熒光素鉀鹽或鈉鹽?熒光素鉀鹽或鈉鹽的穩(wěn)定性怎么樣?
溶解熒光素鉀鹽或鈉鹽于水中,然后分成等份凍存于-80℃,并沒(méi)有有害影響。通常鉀鹽以60mg/ml的濃度溶解,然而鉀鹽的最高溶解度是100mg/ml(自由酸不溶于水,但以10mg/ml的濃度溶于甲醇,或以50mg/ml的濃度溶于DMSO)。但關(guān)于溶解后的熒光素的穩(wěn)定性有一些沖突的報(bào)道,溶解之后可能會(huì)帶入溶液中一些氧,如果儲(chǔ)存的話最后用排空氣體的水溶解熒光素鉀鹽或鈉鹽。
對(duì)于較敏感的實(shí)驗(yàn),然而為了降低實(shí)驗(yàn)中的可變因素(比如,低濃度的酶或不太合適的溫度或鹽濃度可能需要較高濃度的底物來(lái)驅(qū)動(dòng)反應(yīng)的完成),我們建議反應(yīng)所需的試劑最好現(xiàn)配再用。
四、熒光素鉀鹽或鈉鹽之間有什么區(qū)別嗎?
熒光素鉀鹽與鈉鹽之間在應(yīng)用上無(wú)差別,在物理性質(zhì)上有小的差別,比如鈉鹽形式的熒光素某種程度上顆粒性更強(qiáng)一些且比鉀鹽形式的更溶于水。根據(jù)文獻(xiàn)引用的頻率,鉀鹽形式的熒光素的使用次數(shù)是鈉鹽形式的3倍,且大部分研究者喜歡用鉀鹽形式作用于活體,但是兩種鹽形式的熒光素都能很好地起到同等作用。
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