Zymo 質粒中提/大提試劑盒通過利用離心柱或微珠的特殊化學結構和相應緩沖液的針對性作用,實現(xiàn)了對質粒DNA的高效提取。其原理主要包括裂解細胞、選擇性結合質粒DNA、洗滌去除雜質、解吸質粒DNA和純化質粒DNA這幾個步驟。通過這些步驟的組合,可以獲得高純度的質粒DNA樣品,適用于各種分子生物學應用,如限制酶切、PCR擴增和測序等。
Zymo 質粒中提/大提試劑盒的使用方法及應用:
1.培養(yǎng)細菌:將細菌菌株接種到含有相應抗生素的培養(yǎng)基上,并在適當?shù)臏囟葪l件下培養(yǎng)細菌,直至達到適當?shù)募毦芏取?br />
2.收集細菌:將培養(yǎng)的細菌轉移到離心管中,并進行離心,以沉淀細菌細胞。
3.細菌溶解:將離心后的細菌細胞重懸于溶解緩沖液中,溫和地震蕩管,使細菌細胞溶解。
4.蛋白質沉淀:加入蛋白質沉淀試劑,混勻后離心,將上清液倒掉,留下蛋白質沉淀。
5.提取DNA:將DNA結合柱放置于收集管中,將上述蛋白質沉淀溶液加入DNA結合柱中,并進行離心。然后將DNA結合柱轉移到新的收集管中。
6.洗滌DNA:將洗滌緩沖液1加入DNA結合柱中,離心,將上清液倒掉,重復此步驟一次。然后加入洗滌緩沖液2,離心,并將上清液倒掉。
7.質粒DNA重溶:將DNA結合柱轉移到含有洗滌緩沖液3的管中,并在常溫下孵育片刻,通過離心將DNA從DNA結合柱上還原到收集管中。
Zymo 質粒中提/大提試劑盒的維護保養(yǎng)建議:
1.儲存溫度:應儲存在溫度范圍內。根據(jù)產品說明書,通常應在-20℃保存。確保在儲存期間處于恒定的低溫環(huán)境中,避免反復凍融。
2.保持干燥:中的某些組分對潮濕敏感,因此應避免受潮。在使用前,請確保所有試劑瓶蓋都緊閉,并將其放在干燥的地方。
3.避免污染:使用時需注意操作的嚴格無菌條件以避免污染。使用無菌技術和工具,并確保所有操作臺和工作區(qū)都經過清潔消毒。
4.注意過期日期:檢查上的過期日期。過期的試劑可能會導致性能下降或失敗,因此請勿使用過期的試劑。
5.適當保存剩余試劑:當使用完所需的試劑量后,可以將剩余的試劑保存在特定的條件下供以后使用。請根據(jù)產品說明書上的建議保存任何剩余的試劑,并確保它們不會受到污染。
6.按照說明書操作:在使用Zymo質粒提/大提試劑盒時,務必按照產品說明書上的指導進行操作。嚴格遵循說明書中的步驟和注意事項,以確保結果。
7.建議參照其他相關的實驗室維護保養(yǎng)指南:在使用之前,建議充分閱讀其他實驗室維護保養(yǎng)指南。