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022-66387942簡要描述:無血清培養(yǎng)基(2X)With this system, human diploid cells, such as MRC-5, Wi38, and KMB17, can be grown with just 1–2% serum.
此外,它還支持雞胚成纖維細(xì)胞在無血清條件下的生長。 然后可以在無血清條件下進(jìn)行病毒生產(chǎn),無需添加白蛋白或其他補(bǔ)充劑。
Diploid SRM 系統(tǒng)由兩個(gè)不同的套件組成:
1. Diploid Growth Serum-Reduced Medium (SRM) 試劑盒:一種基礎(chǔ)培養(yǎng)基和 100X 生長添加劑,專為細(xì)胞擴(kuò)增而設(shè)計(jì)
2. 二倍體生產(chǎn)無血清培養(yǎng)基 (SFM) 試劑盒(本頁):專為病毒生產(chǎn)設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和 100X 生產(chǎn)補(bǔ)充劑
人類細(xì)胞傳統(tǒng)上被用于制造各種疫苗,例如水痘帶狀皰疹、脊髓灰質(zhì)炎、天花、甲型肝炎、麻疹、腮腺炎和風(fēng)疹疫苗。 傳統(tǒng)上,培養(yǎng)這些細(xì)胞的方法是使用含有 10% 血清的經(jīng)典培養(yǎng)基用于生長,1-5% 人白蛋白(人源或重組)用于病毒生產(chǎn)。 這是疫苗生產(chǎn)中成本最高的兩個(gè)組成部分。 Diploid SRM 系統(tǒng)有助于減少或消除這兩種成分,同時(shí)保持高病毒滴度。
節(jié)約成本:
減少或消除血清可以顯著降低疫苗生產(chǎn)過程的成本。 高級胎牛血清價(jià)格昂貴,價(jià)格波動(dòng)大。 鑒于疫苗生產(chǎn)的典型成本壓力,這兩種經(jīng)濟(jì)驅(qū)動(dòng)因素都使疫苗生產(chǎn)達(dá)到目標(biāo)價(jià)格具有挑戰(zhàn)性。 二倍體生長 SRM 減少了這種價(jià)格波動(dòng)的影響,并提供了一定程度的成本一致性,這是使用大量血清的工藝所不具備的。
另外,血清需要冷凍保存。 生長培養(yǎng)基中 10% 的血清濃度會(huì)導(dǎo)致疫苗過程對冷凍儲(chǔ)存的要求很高。 需要 1,000 L 生長培養(yǎng)基的過程需要冷凍儲(chǔ)存 100 L 血清。 Diploid Growth SRM 試劑盒附帶 100X 冷凍補(bǔ)充劑,可將冷凍儲(chǔ)存要求降低 80%。 1,000 L 的二倍體生長 SRM 只需要 20 L 的冷凍儲(chǔ)存:10 L 用于 FBS,10 L 用于 100X 補(bǔ)充劑。
白蛋白通常添加到病毒生產(chǎn)培養(yǎng)基中。 使用二倍體生產(chǎn) SFM,可以在不添加任何額外添加劑的情況下以相當(dāng)?shù)牡味壬a(chǎn)病毒。
無需適應(yīng):
Diploid SRM 系統(tǒng)是在考慮現(xiàn)有細(xì)胞庫的情況下開發(fā)的。 由于需要使細(xì)胞適應(yīng)新培養(yǎng)基,因此將疫苗過程過渡到新培養(yǎng)基可能具有挑戰(zhàn)性。 對于 MRC-5 等人類細(xì)胞,由于在細(xì)胞適應(yīng)和隨后的細(xì)胞重新儲(chǔ)存過程中需要增加傳代,因此存在達(dá)到 Hayflick 極限的額外風(fēng)險(xiǎn)。 使用二倍體生長 SRM 試劑盒時(shí),過渡到二倍體 SRM 系統(tǒng)不需要適應(yīng)或重新儲(chǔ)存細(xì)胞。 現(xiàn)有的血清庫 cGMP 細(xì)胞可以直接在補(bǔ)充有 1% FBS 的二倍體生長 SRM 中解凍,從而可以簡單地過渡到該培養(yǎng)基。
降低血清供應(yīng)風(fēng)險(xiǎn):
獲得穩(wěn)定的血清供應(yīng)可能具有挑戰(zhàn)性,尤其是當(dāng)所需血清來自新西蘭或澳大利亞等 BSE/TSE 安全區(qū)域時(shí)。 血清供應(yīng)會(huì)根據(jù)多種環(huán)境(干旱、牛?。┖徒?jīng)濟(jì)(飼料成本、乳制品定價(jià))因素而波動(dòng)。 使用二倍體生長 SRM,由于血清需求減少,這種依賴性大大降低。